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              石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡实验周期及交付标准
              石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡实验周期及交付标准
              更新时间:2021-02-19
              访问量: 1226
              厂商性质: 生产厂家

              服务名称: 石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡实验周期及交付标准
              提供商: 上海研研谨生物
              规格: 石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡
              价格: 15元

              石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡实验周期及交付标准产品概述:

              TUNEL凋亡显色法

              TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理是当细胞发生凋亡时,DNA内切酶被激活,核小体间的基因组DNA被切断,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)

              加上带有生物素(Biotin) 标记的dUTP即Bitin-dUTP.,随后于辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的streptavidin结合, 在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到细胞凋亡。

               

              实验意义

              1. TUNEL法是一种分子生物学 与形态学相结合的研究方法,可对完整的单个凋亡细胞或者凋亡小体进行原位染色,可以准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。

              2.可用于石蜡切片冰冻切片培养的细胞等进行细胞凋亡检测,灵敏度远比一般的组织化学和生物化学方法要高。

              3.操作简便快捷,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。

               

              实验步骤

               

              1.石蜡切片TUNEL显色法:

              ①石蜡切片常规脱蜡至水,脱蜡剂二甲苯,至水剂乙醇;

              ②PBS漂洗3*5 min; .

              ③加入蛋白酶K工作液37°C反应15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

              ④4%多聚甲醛(pH7 .4的PBS)室温固定15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑤浸入封闭液(3%H202)室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑥加入适量TdT酶反应液,暗湿盒中37°C反应1 h,用SSC室温15 min终止反应后,PBS漂洗3x5 min; .

              ⑦浸入0.3% H202封闭内源性过氧化物酶活性,室温孵育3-5 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑧滴加Streptavidin-HRP工作液,37*C反应30-60 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑨滴加DAB显色液后用去离子水漂洗数次;

              10.选择是否用DAPI复染细胞核;

              脱水、透明、中性树胶封片后进行观察。

               

              2.冰冻切片TUNEL显色法:

              ①新鲜组织经处理后,立即在恒冷冰冻切片机内切片,厚度为5~6 um;

              ②防脱玻片,贴片,室温阴干约12 h;

              ③4%多聚甲醛(pH7 4的PBS)室温固定10 min, PBS漂洗3x5 min;

              ④浸入封闭液(3%H202)室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑤浸入邇透液(0.1% Triton X-100溶于PBS中),室温通透30 S-2 min;

              ⑥加入适量TdT酶反应液,暗湿盒中37°C反应1 h,用SSC室温15 min终止反应后,PBS漂洗3x5 min; .

              ⑦浸入0.3% H2O2封闭内源性过氧化物酶活性,室温孵育3-5 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑧滴加Streptavidin-HRP工作液,379C反应30-60 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑨滴加DAB显色液后用去离子水漂洗数次:

              @选择是否用DAPI复染细胞核;

              脱水、透明、中性树胶封片后进行观察。

               

               

              实验完成周期及交付标准

              1.实验周期: 1-2周

              2.交付标准:蜡块、切片、染色图片.实验报告(实验步骤、试剂、耗材等)

               

              需确认的信息

              1.样本的种属.

              2.样本的类型(固定的组织or蜡块or切片)

              3.是否提供试剂盒

              4.拍照要求

               

              收费标准服务周期提供结果:

              欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

              更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电询!

               

              实验代做服务:

               

              免疫组化IHC染色实验服务

              细胞、组织TUNEL凋亡染色实验服务

              试剂盒免费代检测

              实验室代做实验项目

               

              透射电镜服务实验服务

              石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡

              核仁组成区嗜银-AGNOR染色实验服务

              免疫共沉淀(CHIRP)实验

              RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验代做

              酶联免疫(ELISA)技术服务

              鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒

              喹诺酮类快速检测试剂盒

              组织芯片/微阵列定制技术服务

               

              染色质免疫沉淀分析(CLIP)实验服务

               

              多因子液相芯片技术(Luminex)实验

              免疫细胞化学ICC实验服务

              ATP/ADP检测实验服务

              蛋白双向(2-D)电泳实验服务

              蛋白相互作用分析

              碱性磷酸酶染色实验服务

              PKC活性检测实验

              非标定量实验

              (Label-free)

               

              DIGE技术实验服务

              端粒酶活性检测实验

              细胞生长曲线的测定

              扫描电镜服务

              NF-KB p65活性检测实验

               

              慢病毒包装实验服务

               

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