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              免疫荧光染色实验操作步骤
              免疫荧光染色实验操作步骤
              更新时间:2021-01-19
              访问量: 1482
              厂商性质: 生产厂家

              服务名称:免疫荧光染色操作步骤
              规格:切片
              价格:80
              收费标准/服务周期/提供结果:
              欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
              更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!

              免疫荧光染色实验操作步骤产品概述:

              免疫荧光染色实验服务

               

               

              制片

              选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。

               

              二、固定

              除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,--般均应固定。

              固定的作用有三:

              1.防止标本从玻片上脱落。

              2.除去防碍抗原抗体结合的类脂,使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果。

              3.固定的标本易于保存,如组织切片固定后在-20%C下可保存一年而不改变其染色特性。

              标本的固定原则是:

              1.不能损伤细胞内的抗原。

              2.不能凝集蛋白质。

              3.不能损伤细胞形态。

              4.固定后应保持细胞膜的通透性,以允许抗体进入与抗原结合。

               

              三、水洗

              固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡冲洗,后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。

               

              四、染色

              染色分直接染色法与间接染色法。

              1.材料与试剂

              (1)荧光抗体,稀释至应用浓度。

              (2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS液

              (3) 9份优质甘油加1份pH7 .4PBS液即为甘油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。

              (4)带盖方盘

              2. 直接染色法

              (1)将固定好的玻片置于湿盘中,滴加荧光抗体染色液,以覆盖为度,加盖,37°C感做30min~45min.

              (2) PBS冲洗3次,每次冲洗3 min,即3x3冲洗。

              (3)蒸馏水冲洗。

              (4)滴甘油缓冲液一滴,封片,荧光显微镜检查。

               

              3.间接染色法

              (1) 检查抗原:

              ①取固定标本,加已知的免疫血清,37°C孵育30 min。

              ②以PBS液3x3冲洗。

              ③再加荧光标记的抗抗体,37°C孵育30 min。

              ④PBS 3x3冲洗。

              ⑤H2O冲洗,凉干。

              ⑥加甘油缓冲液,封片、镜检。

              (2)检查抗体:

              ①兔疫后动物的淋巴组织涂片,自然干燥,甲醇固定。

              ②滴加相应抗原液(按1: 100~1: 500稀释), 37°C孵育30 min.

              ③PBS液3x3冲洗。

              ④加荧光抗体,37°C孵育30 min.

              ⑤PBS液3x3冲洗。

              ⑥水洗,干。

              ⑦加甘油缓冲液,封片、镜检。

               

              [项目开展范围]慢病毒,腺病毒,RNAI类, 分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI. 核心期刊等服务。

               

               

               实验代做服务:

               

              免疫组化IHC染色实验服务

              细胞、组织TUNEL凋亡染色实验服务

              试剂盒免费代检测

              实验室代做实验项目

               

              透射电镜服务实验服务

              石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡

              核仁组成区嗜银-AGNOR染色实验服务

              免疫共沉淀(CHIRP)实验

              RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验代做

              酶联免疫(ELISA)技术服务

              鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒

              喹诺酮类快速检测试剂盒

              组织芯片/微阵列定制技术服务

               

              染色质免疫沉淀分析(CLIP)实验服务

               

              多因子液相芯片技术(Luminex)实验

              免疫细胞化学ICC实验服务

              ATP/ADP检测实验服务

              蛋白双向(2-D)电泳实验服务

              蛋白相互作用分析

              碱性磷酸酶染色实验服务

              PKC活性检测实验

              非标定量实验

              (Label-free)

               

              DIGE技术实验服务

              端粒酶活性检测实验

              细胞生长曲线的测定

              扫描电镜服务

              NF-KB p65活性检测实验

               

              慢病毒包装实验服务

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